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移液器的檢測(cè)和校準(zhǔn)

更新時(shí)間:2011-03-14  |  點(diǎn)擊率:2405

(一)氣密性檢測(cè)

移液器吸滿(mǎn)液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無(wú)液滴,如有,則說(shuō)明漏氣。

(二)準(zhǔn)確性檢測(cè)

1)量程小于1μl,建議使用分光光度法檢測(cè)。將移液器調(diào)至目標(biāo)體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測(cè)定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復(fù)幾次移液操作,計(jì)算移液器的度。

2)量程大于1μl,可以用稱(chēng)重法檢測(cè)。通過(guò)對(duì)水的稱(chēng)重,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),鑒別移液器的準(zhǔn)確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化,且稱(chēng)量天平本身度不符合檢測(cè)要求,檢測(cè)又大多在一個(gè)開(kāi)放式空間內(nèi)操作,偏差在所難免。因而,此種稱(chēng)量法只能現(xiàn)場(chǎng)粗略地判斷移液器的準(zhǔn)確性,進(jìn)一步的校準(zhǔn)必須在專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室操作進(jìn)行。

注意:稱(chēng)重法實(shí)驗(yàn)室*條件是高度靈敏的分析天平(定期校準(zhǔn))、雙蒸水和稱(chēng)量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時(shí)水的密度為0.09982)。

二、專(zhuān)業(yè)校準(zhǔn)

移液器的工作量大,長(zhǎng)期使用,將會(huì)使彈簧彈力發(fā)生變形,加之本身是塑料,不耐磨擦,就會(huì)產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準(zhǔn)確性,必須對(duì)移液器進(jìn)行定期校準(zhǔn)。為了更好地發(fā)揮該類(lèi)計(jì)量?jī)x器的作用,對(duì)新購(gòu)進(jìn)的儀器要進(jìn)行校準(zhǔn)才能使用;對(duì)正在使用的計(jì)量?jī)x器,由于長(zhǎng)期使用會(huì)造成其示值于度量對(duì)象的誤差,這種誤差若不進(jìn)行控制,及時(shí)校正,必定會(huì)影響科研工作。因此,對(duì)使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用。

目前,在許多實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行的常規(guī)檢測(cè)并不能*取代專(zhuān)業(yè)的校準(zhǔn)工作,因?yàn)樾?zhǔn)對(duì)于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術(shù)要求,而這些條件往往是大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室無(wú)法提供的?,F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用統(tǒng)一的移液器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范,利用專(zhuān)業(yè)軟件校正系統(tǒng),通過(guò)計(jì)算機(jī)對(duì)分析天平進(jìn)行在線(xiàn)控制,測(cè)量、數(shù)據(jù)采集、計(jì)算、結(jié)果評(píng)價(jià)等環(huán)節(jié)由軟件控制完成,所有人為操作都被計(jì)算機(jī)記錄隨報(bào)告打印出來(lái),采用電腦對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估認(rèn)證,*排除了人為操縱校準(zhǔn)結(jié)果的可能性,并制定當(dāng)?shù)卮砩烫峁?zhuān)業(yè)的校準(zhǔn)和維修服務(wù)。下面以Eppendorf公司為例,介紹其專(zhuān)業(yè)校準(zhǔn)操作。

(一)校準(zhǔn)的基本操作條件

操作室:獨(dú)立房間,顯示溫度和濕度狀態(tài)。

溫度控制:15~30℃(±0.5℃)

濕度控制:60%~90%

工作臺(tái)面:防震、防塵、遠(yuǎn)離熱源、無(wú)陽(yáng)光直射。

天平:0.000 01g精密分析天平(小數(shù)點(diǎn)后5位),每年需由廠(chǎng)家進(jìn)行校準(zhǔn)。

防蒸發(fā)裝置:Eppendorf提供的濕度阱,防止稱(chēng)量液體的揮發(fā)。

測(cè)試介質(zhì):雙蒸水,每4h更換一次,批次更換周期不大于2周。

(二)操作過(guò)程

1)同溫化處理:校正前,所有移液器及校正介質(zhì)(如工作臺(tái)、天平、雙蒸水等)置于相同操作間至少4h,以確保它們具有相同的溫度。

2)內(nèi)外部清洗。

3)潤(rùn)滑活塞。

4)校準(zhǔn):采用三點(diǎn)校準(zhǔn)法,即根據(jù)移液器量程范圍,選取zui低量程、中間值和zui高量程三點(diǎn)分別測(cè)試10次,各個(gè)測(cè)試點(diǎn)取其平均值,計(jì)算其準(zhǔn)確度(inaccuracy)和度(imprecision),評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)符合DIN 12650要求。

5)  校準(zhǔn)報(bào)告:可根據(jù)客戶(hù)需求提供給算計(jì)打印的標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告或PICASO校正報(bào)告,符合ISO、DIN或ASTM相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

三、影響準(zhǔn)確性的因素

1)操作錯(cuò)誤:包括30℃手持式移液器吸液;與吸嘴不匹配,較易造成脫落;殘留的試劑倒流,污染活塞和密封圈;快速吸液排液,導(dǎo)致部分液體殘留在吸頭上等都會(huì)影響準(zhǔn)確性。

2)移液器損壞:包括移液器的頭部被刮擦,斷裂受損;活塞受污染;彈簧受腐蝕等。

3)操作條件的影響:包括未作調(diào)整吸取與水不同密度的液體;樣品和移液器的差別太大等。

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